易安達(dá)（鹽酸伊立替康脂質(zhì)體注射液）正式獲批！

2022年4月15日，施維雅公司（SERVIER）宣布，其胰腺癌治療藥物易安達(dá)（通用名：鹽酸伊立替康脂質(zhì)體注射液）獲得中國(guó)國(guó)家藥品監(jiān)督管理局（NMPA）正式批準(zhǔn)，與5-氟尿嘧啶（5-FU）和亞葉酸（LV）聯(lián)合用于治療接受吉西他濱治療后進(jìn)展的轉(zhuǎn)移性胰腺癌患者。伊立替康脂質(zhì)體注射液作為一款轉(zhuǎn)移性胰腺癌治療藥物，早前已在多個(gè)國(guó)家和地區(qū)獲批。

本文將從以下三個(gè)方面對(duì)伊立替康脂質(zhì)體進(jìn)行深度分析：

1.伊立替康脂質(zhì)體處方深度分析

2.伊立替康脂質(zhì)體研發(fā)收購(gòu)歷程

3.伊立替康脂質(zhì)體國(guó)內(nèi)現(xiàn)狀及前景

一

 伊立替康脂質(zhì)體處方分析

根據(jù)EMA網(wǎng)站Onivyde的公共評(píng)估報(bào)告（onivyde-epar-public-assessment-report_en）以及易普森公司的文件內(nèi)容（申請(qǐng)公布號(hào)CN 108366965 A），筆者對(duì)伊立替康脂質(zhì)體的處方、成分、成品等方面的信息進(jìn)行了整理及歸納。

1.簡(jiǎn)介

伊利替康脂質(zhì)體成品是含5mg/ml三水合伊立替康（伊立替康蔗糖鹽）活性物質(zhì)的輸注溶液的濃縮物，活性物質(zhì)包裹在脂質(zhì)體中。

其他成分包括：

（1）以脂質(zhì)體形式存在的脂質(zhì)：

DSPC（1,2-二硬脂酰-SN-甘油-3-磷酸膽堿，CDE登記號(hào)：F20180000837；DMF備案號(hào)：6252；AVT貨號(hào)：S01005）；

膽固醇（CDE登記號(hào)：F20170000106；DMF備案號(hào)：024780；AVT貨號(hào)：001001）；

DSPE-MPEG2000（N-（羰基甲氧基聚乙二醇2000）-1,2-二硬脂酰-SN-甘油-3-磷酸乙醇胺鈉鹽，CDE登記號(hào)：F20170000595；AVT貨號(hào)：F01008）

（2）其他輔料:

蔗糖八硫酸酯鉀（CDE登記號(hào)：F20210000349；AVT貨號(hào)：011001，藥用注射級(jí)別，GMP生產(chǎn)，大量現(xiàn)貨供應(yīng)）

HEPES緩沖鹽（CDE及DMF登記中，試劑級(jí)/藥用注射級(jí)，低內(nèi)毒素）

氯化鈉和注射用水。

各組分的詳細(xì)介紹及作用見(jiàn)下文。

2.活性物質(zhì)

鹽酸伊立替康三水合物，分子式為C33H38N4O6•HCl•3H2O。它的相對(duì)分子質(zhì)量為677.18，結(jié)構(gòu)如下：

圖 三水合鹽酸伊立替康結(jié)構(gòu)式

活性物質(zhì)為淡黃色至黃色結(jié)晶粉末，具有吸濕性和光敏性，在DMSO和無(wú)水乙酸中自由溶解，在乙醇中微溶，在pH為4的緩沖液中少量溶解，在pH為2的緩沖液中微溶。由于手性中心的存在，伊立替康表現(xiàn)出立體異構(gòu)性。立體異構(gòu)的來(lái)源是原材料喜樹(shù)堿。

活性物質(zhì)的技術(shù)參數(shù)包括以下檢驗(yàn)項(xiàng)目: 外觀、分析（HPLC）、鑒別（IR、HPLC）、手性純度（UV、HPLC）、氯化物鑒定（pH Eur.）、雜質(zhì)（HPLC）、殘留溶劑（pH Eur.）、水含量（KF）、重金屬（pH Eur.）、溶解度（pH Eur.）、著火殘留（pH Eur.）、微生物限度（pH Eur.）、細(xì)菌內(nèi)毒素（pH Eur.）。

由于其作用機(jī)制，伊立替康具有潛在的遺傳毒性和致癌性。不能排除原料、合成或降解過(guò)程中產(chǎn)生的中間體雜質(zhì)的致突變和致癌潛力。與ICH M7一致，在這些情況下，暴露于誘變雜質(zhì)不會(huì)顯著增加活性物質(zhì)的致癌風(fēng)險(xiǎn)。因此，活性物質(zhì)中的這些雜質(zhì)被控制在非誘變雜質(zhì)的可接受水平，符合ICH Q3A指南中描述的鑒別（0.10%）和確認(rèn)閾值（0.15%）。

穩(wěn)定性結(jié)果表明，活性物質(zhì)具有吸濕性且對(duì)光敏感，在避光和防潮的情況下是足夠穩(wěn)定的。在沒(méi)有特殊儲(chǔ)存條件的情況下儲(chǔ)存于符合規(guī)定的容器中時(shí)，建議的復(fù)驗(yàn)期為3年。

3.成品藥物

（1）產(chǎn)品和藥物開(kāi)發(fā)的描述

成品為白色至微黃色不透明的無(wú)菌濃縮液，用于注射。它由含有鹽酸伊立替康三水合物的脂質(zhì)體等滲分散體組成。

脂質(zhì)體是直徑約110nm的單層磷脂雙分子層小泡，磷脂雙分子層包繞一個(gè)內(nèi)水相，其中含有凝膠或沉淀狀態(tài)的蔗糖鹽形式的伊立替康。脂膜由DSPC、膽固醇和MPEG-2000-DSPE組成。脂質(zhì)體分散在水緩沖溶液中。

根據(jù)原研，當(dāng)通過(guò)喜樹(shù)堿化合物（如伊立替康）與包封多硫酸酯化陰離子捕獲劑（如蔗糖八硫酸酯）的脂質(zhì)體反應(yīng)制備載藥脂質(zhì)體時(shí)，所得載藥脂質(zhì)體的穩(wěn)定性取決于捕獲劑-脂質(zhì)體中硫酸酯基團(tuán)的初始濃度和脂質(zhì)體中包封的喜樹(shù)堿與磷脂的比率。

在優(yōu)選的實(shí)施方式中，伊立替康脂質(zhì)體由DSPC、膽固醇和MPEG-2000-DSPE以3：2：0.015摩爾比組合的混合物制成。脂質(zhì)體制劑包括1,2-二硬脂酰-sn-甘油-3-磷酸膽堿(DSPC)的濃度為約6.81mg/mL、膽固醇的濃度為約2.22mg/mL、甲氧基封端的聚乙二醇(MW 2000)-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(MPEG-2000-DSPE)的濃度為約0.12mg/mL。

圖 伊立替康脂質(zhì)體示意圖

三水合物鹽酸伊立替康以伊立替康蔗糖鹽的形式存在于脂質(zhì)體中。在藥物開(kāi)發(fā)過(guò)程中，篩選了許多不同劑型的陰離子藥物包封液。研究發(fā)現(xiàn)蔗糖八硫酸鹽是一種較好的陰離子藥物包埋溶液。 蔗糖八硫酸酯鹽（sucrose octasulphate）加入到成品生產(chǎn)過(guò)程中，通過(guò)反應(yīng)生成三乙銨蔗糖八硫酸鹽（triethylammonium sucrose octasulphate，TEA-SOS）。與其他劑型相比，該劑型維持了包封率，且伊立替康在脂質(zhì)體中的保留率較高。

蔗糖八硫酸酯鉀（K-SOS）是一種新型輔料，以它為原料，制備了用于脂質(zhì)體載藥的三乙銨蔗糖八硫酸酯鹽（TEA-SOS）。蔗糖八硫酸酯鹽通過(guò)離子交換轉(zhuǎn)化為T(mén)EA-SOS。TEA-SOS與脂質(zhì)經(jīng)聚碳酸酯膜擠壓被動(dòng)包裹形成脂質(zhì)體。隨后，通過(guò)過(guò)濾除去脂質(zhì)體外部的TEA-SOS，形成跨脂質(zhì)體脂膜的電化學(xué)梯度。

圖 蔗糖八硫酸酯結(jié)構(gòu)式

脂膜由DSPC、膽固醇和MPEG-2000-DSPE組成。脂質(zhì)體輔料的功能是產(chǎn)生脂質(zhì)體雙層膜，形成包裹著活性物質(zhì)的單層囊泡，直到被輸送到目標(biāo)部位（如腫瘤組織）。選擇脂質(zhì)體輔料是由于它們的特性，當(dāng)它們結(jié)合在一起時(shí)，產(chǎn)生的脂質(zhì)體能夠主動(dòng)負(fù)載和保留活性物質(zhì)，同時(shí)降低脂質(zhì)體在人體內(nèi)的蛋白結(jié)合水平，從而延長(zhǎng)其在體內(nèi)的循環(huán)時(shí)間。

DSPC是脂質(zhì)體雙分子層的主要脂質(zhì)成分（(優(yōu)選占所有脂質(zhì)成分總重量的74.4％），基于其高純度而選擇。它是一種合成脂類(lèi)，由明確的脂肪酸組成，具有相對(duì)較高的相轉(zhuǎn)變溫度（Tm為55°C），并以高度有序的凝膠相結(jié)構(gòu)存在，在生理溫度（37°C）下抵抗小分子藥物的滲透性。

膽固醇是脂質(zhì)體雙分子層的另一個(gè)主要成分（優(yōu)選占所有脂質(zhì)成分總重量的約24.3％）。它被用于穩(wěn)定脂質(zhì)體磷脂膜免受血漿蛋白的破壞，減少血漿調(diào)理素與脂質(zhì)體的結(jié)合，而后者負(fù)責(zé)將脂質(zhì)體從血液循環(huán)中快速清除。此外，膽固醇與磷脂雙分子層結(jié)合，可以降低溶質(zhì)/藥物的滲透性。

MPEG-2000-DSPE是脂質(zhì)體雙分子層的一個(gè)微量組分（優(yōu)選占所有脂質(zhì)成分總重量的約1.3％）。它在脂質(zhì)體表面提供一個(gè)極小的空間屏障，防止脂質(zhì)體聚集。MPEG-2000-DSPE包被的脂質(zhì)體在大小和藥物包封方面表現(xiàn)穩(wěn)定，通過(guò)平均分子量和多分散性指數(shù)等技術(shù)參數(shù)進(jìn)行衡量。

脂質(zhì)體分散在由HEPES緩沖液、氯化鈉和注射用水組成的緩沖水溶液中。

HEPES，分子式為C8H18N2O4S。分子結(jié)構(gòu)中既含有酸性的磺酸基（－SO3H），又含有兩個(gè)堿性叔胺氮，所以呈現(xiàn)兩性，可用來(lái)配制兩性離子緩沖液。該緩沖溶液一般由一定量的HEPES溶于蒸餾水中，再用氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH至適當(dāng)值。其pH緩沖范圍一般為6.8~8.2。緩沖溶液的濃度以及外界溫度對(duì)其pH值影響不大，因此能夠較長(zhǎng)時(shí)間維持穩(wěn)定的pH值。因HEPES分子中的-SO3H呈現(xiàn)較強(qiáng)的酸性，易給出H+；兩個(gè)叔胺氮各含有一個(gè)孤對(duì)電子，呈現(xiàn)堿性，可以接受H+生成季銨鹽。所以磺酸基和叔胺在水溶液中互為緩沖對(duì)。而且，單個(gè)HEPES分子中的叔胺和磺酸基也可傳遞H+生成內(nèi)鹽，即兩性離子。在水溶液中，HEPES分子、內(nèi)鹽以及磺酸基和叔胺各自產(chǎn)生的離子之間因H+或OH-的轉(zhuǎn)移而能夠相互轉(zhuǎn)化建立平衡關(guān)系，憑借該平衡關(guān)系的移動(dòng)來(lái)抵御外來(lái)酸堿的影響來(lái)調(diào)節(jié)溶液pH值穩(wěn)定，所以具有緩沖作用，其平衡轉(zhuǎn)化關(guān)系見(jiàn)下圖。

HEPES 緩沖溶液具有對(duì)細(xì)胞無(wú)毒性、不易穿過(guò)生物膜、不參與細(xì)胞內(nèi)生化過(guò)程等特點(diǎn)，所以在生化實(shí)驗(yàn)中具有廣泛的應(yīng)用，如可用于開(kāi)放式細(xì)胞生長(zhǎng)、細(xì)胞的長(zhǎng)期觀察、RNA 或 DNA 提取試劑盒中。其次，相關(guān)研究表明以 HEPES 溶液做緩沖液有利于多肽在金納米粒子表面的偶聯(lián)反應(yīng)。另外，HEPES 緩沖溶液對(duì)鎂生物降解影響的相關(guān)實(shí)驗(yàn)表明，HEPES 能提高鎂的生物降解性以及抑制鎂不溶鹽層的形成。

在成品生產(chǎn)過(guò)程的初始階段，鹽酸伊立替康三水合物活性物質(zhì)溶解在葡萄糖溶液中。隨后將其與脂質(zhì)體混合，通過(guò)主動(dòng)載藥方式，沉淀并在脂質(zhì)體中封裝為伊立替康八硫酸蔗糖鹽。鹽酸鹽反離子被蔗糖酸鹽取代，在脂質(zhì)體內(nèi)形成伊立替康蔗糖酸鹽。蔗糖酸鹽與活性物質(zhì)包封在脂質(zhì)體中。

成品藥物的關(guān)鍵質(zhì)量參數(shù)為：外觀、伊立替康鑒定、脂質(zhì)鑒定、膽固醇鑒定、伊立替康濃度、藥物包封百分比、伊立替康雜質(zhì)、脂質(zhì)雜質(zhì)、殘留溶劑、細(xì)菌內(nèi)毒素、生物負(fù)荷及無(wú)菌性、藥物與磷脂比、磷脂與膽固醇比、容器內(nèi)可提取體積、體外釋放、滲透壓、粒徑、粒徑分布、注射顆粒物、pH值、ζ電位。

（2）實(shí)施方式

根據(jù)原研文件，整理部分實(shí)施方式如下：

實(shí)施方式1：

儲(chǔ)存穩(wěn)定的脂質(zhì)體伊立替康組合物，其具有7.00~7.50的pH并且包含包封伊立替康蔗糖八硫酸酯的伊立替康脂質(zhì)體在囊泡中的分散體，所述囊泡由膽固醇和DSPC和MPEG-2000-DSPE組成，所述脂質(zhì)體伊立替康組合物包含伊立替康部分的濃度等同于，以伊立替康游離無(wú)水堿的克數(shù)計(jì)，500mg(±10％)伊立替康部分每mmol總脂質(zhì)體磷脂和4.3mg伊立替康部分每mL所述脂質(zhì)體伊立替康組合物，所述儲(chǔ)存穩(wěn)定的脂質(zhì)體伊立替康組合物在4℃儲(chǔ)存的前6個(gè)月期間穩(wěn)定化以形成小于20mol％溶血-PC。

實(shí)施方式2：

儲(chǔ)存穩(wěn)定的脂質(zhì)體伊立替康組合物在4℃儲(chǔ)存的前6個(gè)月期間穩(wěn)定化以形成小于20mol％溶血-PC，脂質(zhì)體伊立替康組合物通過(guò)方法制備，所述方法包括以下步驟：

(a) 形成脂質(zhì)在TEA8SOS硫酸酯濃度為約0.45M的溶液中的分散體，所述溶液的pH為約6，所述分散體中的脂質(zhì)分別為約3:2:0.015摩爾比的DSPC、膽固醇和MPEG-2000-DSPE；

(b)將60-70℃的脂質(zhì)分散體擠出穿過(guò)至少一個(gè)0.1μm膜以形成脂質(zhì)體；(c)除去在所述脂質(zhì)體外部的源自TEA8SOS的離子；

(d)將在60-70℃溫度的脂質(zhì)體與使用伊立替康游離堿或伊立替康鹽制備的溶液接觸，由此形成包封伊立替康的脂質(zhì)體的制劑；

(e)除去在所述脂質(zhì)體外部的源自TEA8SOS和依立替康成分的物質(zhì)；

(f)將所述組合物的pH調(diào)節(jié)為7.3。實(shí)施方式3：

前述實(shí)施方式任一項(xiàng)的脂質(zhì)體伊立替康組合物，其具有的總伊立替康部分含量等同于4.3mg/ml伊立替康無(wú)水游離堿。實(shí)施方式4：

前述實(shí)施方式任一項(xiàng)的脂質(zhì)體伊立替康組合物，其中包封在所述脂質(zhì)體中的所述伊立替康作為蔗糖八硫酸酯鹽呈凝膠狀態(tài)或沉淀狀態(tài)。

（3）實(shí)施例

基于原研文件，整理實(shí)施例如下：

首先，將形成脂質(zhì)體的脂質(zhì)溶解于加熱的乙醇中。這些脂質(zhì)包括DSPC、膽固醇和MPEG-2000-DSPE，摩爾比為3:2:0.015。所得乙醇-脂質(zhì)組合物分散于包含取代銨和聚陰離子的含水介質(zhì)中。脂質(zhì)體分散體可以例如如下形成：在大于脂質(zhì)轉(zhuǎn)變溫度的溫度(例如60-70℃)，將乙醇脂質(zhì)溶液與包含取代銨離子和聚陰離子的水溶液混合，然后在壓力下將所得脂質(zhì)懸浮液(多層脂質(zhì)體)擠出穿過(guò)一個(gè)或多個(gè)聚碳酸酯膜過(guò)濾器，所述膜過(guò)濾器具有限定的孔徑，例如50nm、80nm、100nm或200nm。

優(yōu)選取代銨為質(zhì)子化三乙胺(TEA)，聚陰離子為蔗糖八硫酸酯(SOS)，優(yōu)選以化學(xué)計(jì)量比組合(例如TEA8SOS)。TEA8SOS的濃度可以基于伊立替康加載到脂質(zhì)體中的量進(jìn)行選擇(例如*耗盡脂質(zhì)體上的濃度加載梯度，和/或提供包含約1:8摩爾比的SOS和伊立替康的脂質(zhì)體)。然后除去所有非截留TEA或SOS(通過(guò)凝膠過(guò)濾，滲析或超濾/滲濾等)。

然后，在可以有效將伊立替康加載到捕獲劑脂質(zhì)體中的條件下(即，在允許伊立替康進(jìn)入脂質(zhì)體中以與離開(kāi)脂質(zhì)體的TEA交換的條件下)，將所得捕獲劑脂質(zhì)體(例如包封取代銨化合物，例如TEA8SOS)與伊立替康溶液接觸。加載伊立替康的溶液(例如15毫克/毫升的無(wú)水伊立替康-HCl，其可以使用相應(yīng)量的伊立替康-HCl三水合物制備)優(yōu)選包含滲透劑(例如5％葡萄糖)和pH為6.5。主動(dòng)載藥通過(guò)增加組合物的溫度高于脂質(zhì)體脂質(zhì)的轉(zhuǎn)變溫度(例如增至60-70℃)以加速取代銨化合物(例如TEA)和伊立替康的跨膜交換來(lái)促進(jìn)。在一些實(shí)施方式中，伊立替康蔗糖八硫酸酯在脂質(zhì)體中呈凝膠狀態(tài)或沉淀狀態(tài)。優(yōu)選繼續(xù)通過(guò)脂質(zhì)體與取代銨化合物(例如TEA)跨膜交換來(lái)加載伊立替康，直到全部取代銨化合物(例如TEA)從脂質(zhì)體中除去，從而耗盡所有跨膜脂質(zhì)體的濃度梯度。

可以除去脂質(zhì)體外伊立替康和取代銨化合物(例如TEA)以得到最終伊立替康脂質(zhì)體產(chǎn)品。這種除去可以通過(guò)各種方法促進(jìn)，包括凝膠(尺寸排阻)色譜法、滲析法、離子交換法和超濾/滲濾法。脂質(zhì)體外部介質(zhì)替換為可注射的藥用流體，例如緩沖(優(yōu)選pH為7.2至7.3)等滲鹽水。

最后，脂質(zhì)體組合物進(jìn)行滅菌，例如通過(guò)0.2微米過(guò)濾，將其分配到單劑量小瓶中，標(biāo)記和儲(chǔ)存，例如在2-8℃冷藏，直至使用。在除去剩余脂質(zhì)體外伊立替康和銨/取代銨離子(例如TEA)的同時(shí)，脂質(zhì)體外部介質(zhì)可以用藥用流體替代。

二、 伊立替康脂質(zhì)體Onivyde研發(fā)收購(gòu)歷程

伊立替康，又名CPT-11、開(kāi)普拓等，屬于喜樹(shù)堿衍生物，拓?fù)洚悩?gòu)酶I抑制劑，是國(guó)際抗癌藥物市場(chǎng)上一大類(lèi)主導(dǎo)產(chǎn)品，目前廣泛應(yīng)用于結(jié)腸癌等腫瘤疾病的治療，對(duì)氟尿嘧啶耐藥病例仍有效。目前該藥已在100多個(gè)國(guó)家上市，臨床上廣泛應(yīng)用于轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌、小細(xì)胞肺癌的一/二線(xiàn)、胰腺癌的一/二線(xiàn)治療，2001年在國(guó)內(nèi)上市。

圖 伊立替康結(jié)構(gòu)式

伊立替康能在羧酸酯酶作用下轉(zhuǎn)化成具有100-1000倍更高活性的代謝物SN-38。SN-38不可被P-糖蛋白識(shí)別，因此伊立替康可能在對(duì)其它標(biāo)準(zhǔn)化學(xué)療法具有抗性的腫瘤上具有活性。

最初投入市場(chǎng)的制劑類(lèi)型是鹽酸伊立替康注射液，但在實(shí)際使用的過(guò)程中，該劑型逐漸暴露出一個(gè)問(wèn)題：伊立替康的內(nèi)酯環(huán)結(jié)構(gòu)易水解，在pH>6條件下平衡快速向羧酸鹽型方向轉(zhuǎn)化。羧酸鹽型的伊立替康藥理活性低，毒性更強(qiáng)。生理?xiàng)l件（pH 7.4）下，由于血清蛋白優(yōu)先與羧酸鹽絡(luò)合而使平衡偏向活性低的羧酸型，造成有效的內(nèi)酯型比例過(guò)低，達(dá)到平衡時(shí)，“低效高毒”的羧酸鹽形式化合物所占比重高達(dá)90%。因此，研制一種提高內(nèi)酯型穩(wěn)定性的伊立替康制劑的需求愈發(fā)迫切。

圖 伊立替康內(nèi)酯型→伊立替康羧酸型的轉(zhuǎn)化過(guò)程

于是，研發(fā)者們將目光投向了新型藥物遞送系統(tǒng)——脂質(zhì)體，經(jīng)過(guò)十多年研發(fā)，終于成功研制出伊立替康脂質(zhì)體Onivyde，并由此引出了一段波折起伏的故事。

2003年2月，中國(guó)臺(tái)灣智擎生技制藥（PharmaEngine）創(chuàng)立，其總經(jīng)理葉常菁博士慧眼識(shí)珠，以300萬(wàn)美金的價(jià)格從美國(guó)Hermes Biosci公司購(gòu)得PEP02（MM-398，Onivyde前身）的開(kāi)發(fā)權(quán)利，帶領(lǐng)二十多名員工潛心研發(fā)十多年。

2012年，該項(xiàng)目在中國(guó)臺(tái)灣以外的市場(chǎng)及開(kāi)發(fā)等全部活動(dòng)權(quán)以約2.2億美元的價(jià)格授權(quán)給美國(guó)Merrimack公司。從300萬(wàn)到2.2億，僅用了9年時(shí)間。

2014年Merrimack公司又將該項(xiàng)目除美國(guó)和中國(guó)臺(tái)灣之外的所有權(quán)以約10億美元的價(jià)格售予美國(guó)Baxter（百特）。其后，Baxter開(kāi)始進(jìn)行該項(xiàng)目在其它國(guó)家及地區(qū)的新藥申請(qǐng)并將美國(guó)以外市場(chǎng)授權(quán)Shire（夏爾）。

2015年，Onivyde通過(guò)美國(guó)FDA新藥上市核準(zhǔn)，聯(lián)合5-氟尿嘧啶和甲酰四氫葉酸（5-FU/LV），用于治療既往接受吉西他濱為基礎(chǔ)的化療藥物治療病情進(jìn)展的胰腺轉(zhuǎn)移性腺癌患者。

2016年10月，Onivyde獲得歐洲EMA新藥上市核準(zhǔn)。

2017年，Onivyde獲得韓國(guó)及新加坡藥證核準(zhǔn)。

2017年，Merrimack再次出售該項(xiàng)目，將其美國(guó)的商業(yè)化權(quán)力和制備生產(chǎn)線(xiàn)以最高10.25億美元的總價(jià)售予IPSEN。

2018年，Shire將旗下腫瘤學(xué)業(yè)務(wù)以24億美元打包出售給Servier（施維雅），其中包括Onivyde。

2020年6月日本批準(zhǔn)Onivyde上市，用于治療化療后無(wú)法切除的胰腺癌。

2022年4月15日，Onivyde（中文商品名：易安達(dá)）獲得中國(guó)國(guó)家藥品監(jiān)督管理局（NMPA）正式批準(zhǔn)，用于治療轉(zhuǎn)移性胰腺癌。

自此，Onivyde出售史暫時(shí)告一段落，目前由三家公司持有，分別是中國(guó)臺(tái)灣智擎（中國(guó)臺(tái)灣地區(qū)）、Servier公司（歐亞區(qū)）及IPSEN公司（美洲區(qū)）。

圖 Onivyde授權(quán)/轉(zhuǎn)讓歷程示意圖

Onivyde僅用十余年就從300萬(wàn)美元的技術(shù)包發(fā)展到10億、24億美元的大項(xiàng)目，但業(yè)界均認(rèn)為這是劃算的買(mǎi)賣(mài)，因?yàn)槠涿闇?zhǔn)的是“癌王”胰腺癌，此外相關(guān)公司也在積極開(kāi)發(fā)其他適應(yīng)癥，包括胃癌，肺癌，結(jié)直腸癌等。

圖Onivyde其他適應(yīng)癥及對(duì)應(yīng)開(kāi)發(fā)階段

胰腺癌的治療一直是以吉西他濱為基礎(chǔ)的化療為主，對(duì)于復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移性的沒(méi)有好的治療方案。Onivyde是目前核準(zhǔn)使用在曾接受一線(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)治療藥物吉西他濱失敗后的晚期轉(zhuǎn)移性胰腺癌的新藥。是近年來(lái)獲批的二線(xiàn)治療用藥。

目前Onivyde在美國(guó)售價(jià)為每針2,590美元左右，每二周打一次，平均全年藥費(fèi)約為11.7萬(wàn)美元，僅IPSEN公司（美洲區(qū)）2019年該藥品銷(xiāo)售額已達(dá)1.35億歐元，2020年為1.23億歐元。此外，考慮到Onivyde有多個(gè)適應(yīng)癥（大腸直腸癌、胃癌、小細(xì)胞肺癌等）已進(jìn)入臨床二/三期試驗(yàn)，可以預(yù)期未來(lái)其銷(xiāo)售額及市場(chǎng)價(jià)值必呈上漲趨勢(shì)。

三、 伊立替康脂質(zhì)體在國(guó)內(nèi)的現(xiàn)狀及前景

2022年4月15日，施維雅公司（SERVIER）宣布其胰腺癌治療藥物易安達(dá)（通用名：鹽酸伊立替康脂質(zhì)體注射液）已獲得中國(guó)國(guó)家藥品監(jiān)督管理局（NMPA）正式批準(zhǔn)。

Onivyde在美國(guó)的于2025年到期，該也進(jìn)入了中國(guó)。根據(jù)目前的藥物注冊(cè)管理辦法，現(xiàn)在已經(jīng)可以著手進(jìn)行該藥物的注冊(cè)申報(bào)，待完成臨床、審評(píng)及生產(chǎn)準(zhǔn)備后，預(yù)計(jì)可在到期時(shí)獲批上市。

Onivyde的仿制存在幾個(gè)突出優(yōu)勢(shì)：

①技術(shù)壁壘小，仿制難度低；

②工藝與阿霉素脂質(zhì)體相似，可并線(xiàn)生產(chǎn)；

③處方及大致工藝已知；

④市場(chǎng)規(guī)模及利潤(rùn)具潛力；

⑤原研即將到期。接下來(lái)筆者將對(duì)其中幾點(diǎn)進(jìn)行具體分析。

從生產(chǎn)工藝的角度，伊立替康脂質(zhì)體的制備技術(shù)采用的是梯度主動(dòng)包封法，工藝過(guò)程分為乳化、擠壓整粒、超濾除醇/置換體系、藥物包封和過(guò)濾除菌等。這種生產(chǎn)工藝和已上市的鹽酸多柔比星脂質(zhì)體等主動(dòng)載藥的品種類(lèi)似，基本可以對(duì)現(xiàn)有已成熟的開(kāi)發(fā)流程和生產(chǎn)放大工藝進(jìn)行復(fù)制，具有較強(qiáng)的技術(shù)可行性。

從注冊(cè)審評(píng)的角度，藥審機(jī)構(gòu)對(duì)脂質(zhì)體等特殊制劑的審評(píng)較為審慎，對(duì)一致性評(píng)價(jià)及報(bào)批工藝的可放大性要求較高。所以在申報(bào)時(shí)需要有充分的一致性評(píng)價(jià)數(shù)據(jù)（CMC&Preclinical），同時(shí)申報(bào)的工藝應(yīng)相對(duì)成熟。

圖 國(guó)內(nèi)伊立替康脂質(zhì)體藥品注冊(cè)與受理情況（截止2021年，數(shù)據(jù)來(lái)源：藥智網(wǎng)）

圖 國(guó)內(nèi)伊立替康脂質(zhì)體臨床試驗(yàn)情況（截止2021年，數(shù)據(jù)來(lái)源：藥智網(wǎng)）

由于最近的藥政改革，未來(lái)預(yù)計(jì)還會(huì)有更多廠家進(jìn)入特殊制劑領(lǐng)域，類(lèi)似于Onivyde這種品種較新，市場(chǎng)潛力巨大的項(xiàng)目，成為各廠家競(jìng)相仿制熱點(diǎn)的勢(shì)頭已初露端倪。而基于上述分析，相關(guān)企業(yè)入場(chǎng)的時(shí)間窗口仍然存在。

四

 討論

關(guān)于伊立替康脂質(zhì)體，筆者希望從以下幾個(gè)方面進(jìn)行討論： 

（1）伊立替康脂質(zhì)體研發(fā)要點(diǎn)

伊立替康脂質(zhì)體研發(fā)工作聚焦于以下幾點(diǎn)：①選擇一種理想的反荷離子（counter ion）用于主動(dòng)載藥；②確定一個(gè)脂質(zhì)膜組分中DSPC與膽固醇的最佳比例，該比例影響脂質(zhì)膜的物化性質(zhì)以及將活性物質(zhì)保留在脂質(zhì)體內(nèi)部的能力；③脂質(zhì)膜組分MPEG-2000-DSPE的選擇，該組分存在于脂質(zhì)膜表面，提供了一個(gè)空間位阻，從而避免脂質(zhì)體聚集；④選擇適當(dāng)?shù)木彌_液，能夠?yàn)樽⑸溆脻饪s液保持最佳pH范圍。

（2）脂質(zhì)體藥物遞送系統(tǒng)

脂質(zhì)體（liposome）是一種由單個(gè)雙分子層（單層）和/或一系列同心雙分子層（多層）組成的球狀微囊，用于包裹營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)或原料藥，大小通常為納米到微米級(jí)。脂質(zhì)體的主要組成材料是磷脂和膽固醇。磷脂是脂質(zhì)體的主要成膜材料，常用的磷脂有卵磷脂、磷脂酰膽堿、大豆磷脂、磷脂酰乙醇胺等。

當(dāng)脂質(zhì)體用于藥物遞送時(shí)，藥物通常包封在脂質(zhì)體內(nèi)部，一般而言水溶性藥物包封在水性隔室中，親脂性藥物則包封在脂質(zhì)雙分子層中。脂質(zhì)體作為藥物遞送系統(tǒng)有如下優(yōu)勢(shì)：

①被動(dòng)靶向：脂質(zhì)體被體內(nèi)巨噬細(xì)胞吞噬，形成肝，脾等網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的被動(dòng)靶向性。

②緩釋作用：脂質(zhì)體包裹的藥物，減少了腎排泄和代謝，形成一個(gè)緩慢釋放的過(guò)程。

③降低藥物毒性：被動(dòng)靶向作用使得藥物容易集中于部分器官，可明顯降低藥物毒性。

④提高穩(wěn)定性：不穩(wěn)定藥物能被磷脂膜保護(hù)，并通過(guò)調(diào)節(jié)內(nèi)水相pH、離子濃度等條件，可有針對(duì)性地提升目標(biāo)藥物的穩(wěn)定性。

目前脂質(zhì)體作為藥物遞送系統(tǒng)已得到了廣泛應(yīng)用，如抗腫瘤藥物（注射用紫杉醇脂質(zhì)體(南京綠葉制藥)，注射用鹽酸多柔比星脂質(zhì)體（Doxil），注射用柔紅霉素脂質(zhì)體（DaunoXome））；

抗真菌藥物（注射兩性素B脂質(zhì)體(Amphotec)）；疫苗（甲肝疫苗（Epaxal）、流感疫苗(Inflexal V)）等。

此外，長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體、主動(dòng)靶向脂質(zhì)體和遞送生物分子的陽(yáng)離子脂質(zhì)體已經(jīng)相繼問(wèn)世，基于這些成果，脂質(zhì)體藥物己愈來(lái)愈受到重視并得到廣泛應(yīng)用。

對(duì)伊立替康而言，其最初上市的劑型為普通注射劑，但存在嚴(yán)重的不良反應(yīng)，在臨床應(yīng)用上存在一定的局限性。采用脂質(zhì)體作為伊立替康給藥載體，可避免生理?xiàng)l件下伊立替康大量轉(zhuǎn)變?yōu)轸人猁}形式，顯著提高藥效，同時(shí)增加藥物向腫瘤部位的轉(zhuǎn)運(yùn)，降低不良反應(yīng)。

（3）蔗糖八硫酸酯鉀對(duì)比硫酸銨：兩種主動(dòng)載藥方式的比較

脂質(zhì)體常用制備方法主要有薄膜分散法、逆相蒸發(fā)法、注入法、超聲波分散法等。在制備含藥脂質(zhì)體時(shí)，根據(jù)藥物被裝載的機(jī)理不同，又可分為被動(dòng)載藥法與主動(dòng)載藥法兩大類(lèi)。

傳統(tǒng)上采用較多的是被動(dòng)載藥法，即首先將藥物溶于水相或有機(jī)相，然后用適宜方式制備含藥脂質(zhì)體。但該方法僅適用于脂溶性或水溶性強(qiáng)的藥物，而對(duì)于兩親性藥物，如某些弱酸弱堿，其油水分配系數(shù)受介質(zhì)pH和離子強(qiáng)度的影響較大，用被動(dòng)載藥法制得的脂質(zhì)體包封率低。

主動(dòng)載藥法，即通過(guò)內(nèi)外水相的不同離子或化合物梯度進(jìn)行載藥，對(duì)兩親性藥物脂質(zhì)體的包封率高、滲漏少。鹽酸伊立替康作為兩親弱堿性藥物，其水溶性較好，采用主動(dòng)載藥法可獲得較高的包封率。

國(guó)內(nèi)大多數(shù)廠家采用硫酸銨梯度法制備伊立替康脂質(zhì)體。美國(guó)FDA于2015年10月批準(zhǔn)上市的鹽酸伊立替康脂質(zhì)體注射液，采用的主動(dòng)載藥方法是蔗糖八硫酸酯三乙胺（TEA8SOS）梯度法。中國(guó)藥科大學(xué)的吳剛等對(duì)這兩種主動(dòng)載藥方式進(jìn)行了研究與對(duì)比。

載藥量方面，兩種方法的載藥量分別為32.0%、25.8%，蔗糖八硫酸酯法略勝一。

釋藥方面，在PBS中的釋放結(jié)果表明，兩種主動(dòng)載藥法制備的鹽酸伊立替康脂質(zhì)體的釋藥速率存在明顯差別（24h時(shí)硫酸銨梯度法制備的伊立替康脂質(zhì)體釋藥比例已達(dá)90%，而蔗糖八硫酸酯法對(duì)應(yīng)的釋藥比例僅約40%)。由于蔗糖八硫酸酯和鹽酸伊立替康可以在內(nèi)水相中形成沉淀，因此提高了鹽酸伊立替康在脂質(zhì)體中的滯留效果，使藥物釋放速率明顯減慢。

圖8 兩種主動(dòng)載藥方式制備的鹽酸伊立替康脂質(zhì)體的體外釋放曲線(xiàn)（n=3）

如上文所述，由于伊立替康的內(nèi)酯環(huán)結(jié)構(gòu)在中性及堿性溶液中不穩(wěn)定，從脂質(zhì)體中釋放出的藥物在生理?xiàng)l件下容易水解成沒(méi)有活性且毒性更高的開(kāi)環(huán)產(chǎn)物從而降低藥效，因此與硫酸銨梯度法相比，以蔗糖八硫酸酯三乙胺梯度法主動(dòng)載藥的伊立替康脂質(zhì)體可以更好地保持藥物活性。

（4）HEPES緩沖體系：

HEPES，分子式為C8H18N2O4S。屬于兩性分子，可用來(lái)配制兩性離子緩沖液。其pH緩沖范圍一般為6.8~8.2。緩沖溶液的濃度以及外界溫度對(duì)其pH值影響不大，因此能夠較長(zhǎng)時(shí)間維持穩(wěn)定的pH值。HEPES 緩沖溶液具有對(duì)細(xì)胞無(wú)毒性、不易穿過(guò)生物膜、不參與細(xì)胞內(nèi)生化過(guò)程等特點(diǎn)，在生物制劑領(lǐng)域獲得越來(lái)越廣泛的關(guān)注與應(yīng)用。

五、 回顧與展望

伊立替康是喜樹(shù)堿的半合成衍生物，早在1960年研發(fā)人員就發(fā)現(xiàn)了喜樹(shù)堿的抗腫瘤特性，1980年發(fā)現(xiàn)了它與拓?fù)洚悩?gòu)酶I的相互作用機(jī)理，后來(lái)經(jīng)過(guò)對(duì)喜樹(shù)堿的進(jìn)一步研究，分別于1994年和1996年研制出了兩種新型水溶性喜樹(shù)堿類(lèi)衍生物：伊立替康（irinotecan）和拓?fù)涮婵担╰opotecan），然而由于伊立替康在生理?xiàng)l件下（pH7.4）會(huì)大量水解成沒(méi)有活性且毒性更高的開(kāi)環(huán)產(chǎn)物導(dǎo)致嚴(yán)重的不良反應(yīng)，導(dǎo)致其在臨床應(yīng)用上一直存在較大的局限性。

好在，快速發(fā)展的醫(yī)藥科技為這一困局帶來(lái)了曙光。長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體等新興藥物遞送技術(shù)的使用，蔗糖八硫酸酯三乙胺梯度法等新型主動(dòng)載藥方法的建立，以及蔗糖八硫酸酯鉀、DSPE-MPEG2000、HEPES等新型藥用輔料的出現(xiàn)，這些因素在研發(fā)人員十余年甚至數(shù)十年的堅(jiān)持與探索下，統(tǒng)合到一起，幫助伊立替康這一“古老”的化合物再次煥發(fā)出生機(jī)。

參考資料：

1. Onivyde文件（申請(qǐng)公布號(hào)CN 108366965 A）

2. EMA，onivyde-epar-public-assessment-report_en

3. 吳剛、周玉潔、魏悅蕾等，兩種主動(dòng)載藥的伊立替康脂質(zhì)體釋藥行為的對(duì)比考察。中國(guó)醫(yī)院藥學(xué)雜志，2018年８月第38卷第16期

4. 艾偉拓，學(xué)術(shù)推廣專(zhuān)題資料，伊立替康脂質(zhì)體深度分析